摘要：目的：比較食品工業中常用的消毒劑、常用的防腐劑及幾種天然成分對鼠傷寒沙門氏菌(Salmonellayphimurium)生物被膜的影響。方法：通過在培養過程中添加不同種類、不同濃度的清除劑，測定所選清除劑對生物被膜形成過程的影響;用所選的清除劑對成熟生物被膜進行浸泡處理，評估每種清除劑不同含量下的清除效果;利用MTT法測定經不同清除劑處理后生物被膜菌內細胞的代謝活性;采用稀釋平板涂布法計算不同物質處理后生物被膜內細菌的存活數。結果：消毒劑乙醇(50%)、過氧化氫(1%)、苯扎氯銨(0.6%)、苯扎溴銨(0.6%)，天然成分香芹酚、肉桂醛和百里香精油(1.0μL/mL)在較低濃度下即可有效抑制S.typhimuriumCDC3和S.yphimuriumST34生物被膜的產生;消毒劑洗潔精、過氧化氫和天然成分香芹酚、肉桂醛和百里香精油在清除成熟生物被膜方面表現出了一定的優勢，其中清除效率最理想的是過氧化氫，最大可達90%左右，洗潔精最大清除率可至80%，香芹酚、肉桂醛和百里香精油可達70%左右;消毒劑乙醇、苯扎氯銨和苯扎溴銨，以及天然成分香芹酚、肉桂醛和百里香精油可以明顯降低生物被膜菌的細胞代謝活性及活菌存活數，可將生物被膜內活菌數降低個log值。結論：對于成熟生物被膜的清除，在初始的培養中添加清除劑或是天然成分可以更加完全有效的控制生物被膜的產生。

　　關鍵詞：鼠傷寒沙門氏菌，生物被膜，消毒劑，食品防腐劑，天然成分，抑制作用，清除效果

　　鼠傷寒沙門氏菌(Salmonellatyphimurium)是引起急性胃腸炎的主要病原菌之一，是目前世界各國分離率最高的菌型之一[1]。它能引起各種家禽和哺乳動物的傳染病，也可造成人類感染，對食品安全和公共衛生具有重要的影響[2,3]。在食品工業中，S.typhimurium常以生物被膜的形態存在于加工器械表面。生物被膜(biofilm)是一種復雜的多糖蛋白復合物，它由附著在接觸面的細菌以及細菌分泌的胞外聚合物(EPS)組成。一旦生物被膜形成之后，菌體對宿主免疫系統的抵御能力增強，對常用的消毒劑、抗生素等也表現出更強地耐受性[46]。

　　生物工程論文：紫花苜蓿非生物脅迫應答分子機制

　　與浮游細菌相比，生物被膜菌對各種殺菌劑和環境變化的敏感性大大降低，對抑菌成分的耐受性也更強，這使得清除食品加工設施上的生物被膜成為一個巨大的挑戰[7,8]。S.typhimurium生物被膜的形成往往在固液相交界處，是一個動態的過程。生物被膜形成初始時，菌體在固體接觸面附著，隨著細菌生長繁殖，菌體數量逐步增大。當菌體達到一定濃度時，細菌感應到濃度信號，生長狀態開始變化，多糖、胞外蛋白等開始合成，逐漸形成成熟的生物被膜[9,10]。

　　當菌體感應到外界環境適應時，生物被膜脫落使菌體暴露而重新游離，直至遇到新的條件而再次形成生物被膜，如此往復，對食品工業造成較大困擾[11,12]。目前對于生物被膜的控制方法主要包括以下幾種：物理法、化學法和生物法。物理法有超聲波法、電擊法和紫外照射等;化學方法主要是指一些化學消毒劑、表面活性劑和金屬螯合物等;生物法目前研究主要集中于抗生物及其衍生物、抗菌藥物聯合使用、天然產物等[13,14]。其中物理法中研究較多的是超聲波處理和紫外照射，李燕杰等[15]用超聲波對單核增生李斯特菌生物被膜進行處理，得出當超聲功率為250、溫度35℃和時間min時，被膜清除率可達到96.34%的結論;翟立公等[16]的研究發現：―84‖消毒液、過氧化氫、―果蔬凈‖對生物被膜都有清除作用，可以使部分生物被膜脫落。

　　―84‖消毒液對生物被膜中菌體的殺菌效果最好;過氧化氫只有高濃度時可以殺滅生物被膜中的菌;―果蔬凈‖幾乎沒有殺菌作用。常冰雪[17]用乙醇、洗潔精和過氧化氫對銅綠假單胞菌生物被膜進行處理發現，過氧化氫具有很好的清除效果，在實驗設置最高濃度(6%)下能清除超過50%的生物被膜。―84‖消毒液在有效氯含量在256μg/mL時僅能清除20%左右的生物被膜。這說明不同種屬的菌株可能對消毒劑或是抑菌物質的耐受性是不同的。近幾年對生物被膜的控制研究多集中于天然植物提取物或是生物制劑方面。如戴雨蕓等[18]發現香芹酚對金黃色葡萄球菌生物被膜形成的抑制和生物被膜的清除均有較強作用效果。

　　朱軍莉等[19]的實驗結果表明隨著茶多酚和葡萄籽提取物作用質量濃度增加對假單胞菌生長和生物被膜的抑制作用增強，但在清除成熟生物被膜方面沒有較好的作用。王琳等[20]的研究結果顯示金銀花提取物和蒲公英提取物可以破壞假單胞菌生物被膜結構，從而清除生物被膜，并且清除效果隨質量濃度的增加而逐漸增強。本研究分別選取了食品工業常用的幾種消毒劑、食品工業常用的食品防腐劑以及幾種天然成分。從對S.yphimurium生物被膜的形成過程及清除效果著手，評估各類清除劑在控制S.typhimurium生物被膜方面的優劣勢，可以為食品工業中該類菌株生物被膜的控制提供一定的參考。

　　1材料與方法

　　1.1材料與儀器

　　鼠傷寒沙門氏菌S.typhimuriumCDC3由南京疾病預防與控制中心贈與;鼠傷寒沙門氏菌S.yphimuriumST34南京農業大學食品科技學院酶工程實驗室保存菌株。菌株在含有25%甘油的凍存管中于80℃冰箱中冷凍保存。MTT(噻唑藍)、苯扎氯銨、苯扎溴銨、香芹酚、肉桂醛、雙乙酸鈉、乳酸鈉、苯甲酸鈉、山梨酸鉀、乳酸鏈球菌素上海麥克林試劑公司;茶多酚、百里香精油上海源葉生物科技公司;結晶紫粉末、無水乙醇、乙二胺四乙酸(EDTA)國藥集團;十二烷基磺酸鈉(SDS)北京索萊寶科技有限公司。

　　TryptoneSoyBroth(TSB)培養基：胰蛋白胨17g，大豆蛋白胨3g，氯化鈉5g，葡萄糖2.5g，磷酸氫二鉀2.5g，去離子水1000mL，pH7.07.5，115℃滅菌30min;LuriaBertani(LB)培養基：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化鈉10g，pH7.07.5，121℃滅菌20min;0.5%結晶紫配制方法：結晶紫2.5g，草酸銨4g，95%乙醇100mL，400mL去離子水，超聲至完全溶解后備用。Multiskan™FC多功能酶標儀、T1300Ⅱ級生物安全柜賽默飛世爾科技公司;SX700高壓蒸汽滅菌鍋日本Tomy公司;SB5200DT超聲波清洗儀寧波新芝生物科技股份有限公司;AY120電子天平日本島津公司;TDL802C低速臺式離心機上海安亭科學儀器廠;DRP9162恒溫培養箱上海森信實驗儀器有限公司。

　　1.2實驗方法

　　1.2.1菌株的活化與培養

　　取80℃凍存的菌株S.typhimuriumCDC3和S.typhimuriumST19接種于TSB液體培養基中37℃180r/min條件下活化兩次，然后接種于TSA平板上，挑取單菌落接種于新鮮的TSB培養基中37℃180r/min過夜培養，備用。

　　1.2.2不同清除劑濃度的確定根據中華人民共和國國家標準GB27602014中明確規定的各類食品添加劑的限量標準，以此確定各類清除劑的添加比例及濃度44。根據各類添加劑的限量標準，配制相應的母液濃度，苯甲酸鈉，山梨酸鉀，SDS，EDTA，雙乙酸鈉，乳酸鈉等121℃，滅菌20min;苯扎氯銨，苯扎溴銨，百里香精油，香芹酚，肉桂醛，茶多酚，洗潔精，―84‖消毒液，無水乙醇，30%過氧化氫等用0.22μm濾膜過濾除菌后備用。

　　1.2.3不同清除劑對S.typhimurium生長及生物被膜形成的影響將已進行無菌處理的清除劑(消毒劑：洗潔精、、無水乙醇、苯扎氯銨、苯扎溴銨、EDTA和SDS;食品防腐劑：苯甲酸鈉、山梨酸鉀、乳酸鈉和雙乙酸鈉;天然成分物質：香芹酚、肉桂醛、百里香精油、茶多酚和乳酸鏈球菌素)在原濃度的基礎上進行梯度稀釋，以SDS為例：SDS原濃度為1%，用TSB液體培養基將其依次稀釋至0.1%，0.2%，0.4%，0.6%，0.8%，1%。將兩株S.yphimurium以1%的接種量分別接種于上述稀釋好的溶液中，然后吸取200μL液體接種于96孔聚乙烯板中。每個處理設置三個平行，并設置陰性對照(只添加TSB液體培養基)和陽性對照(添加TSB液體培養基并接種1%的S.yphimurium)。

　　于37℃恒溫培養箱中靜置培養48后，觀察不同濃度的添加劑處理后生物被膜的形成情況并測定OD600nm處的吸光度值，然后采用結晶紫染色法對生物被膜進行定量測定。結晶紫染色法的操作步驟參考PrattL[21]和楊維青等人[22]的方法，具體如下：棄去96孔板中多余培養基，用無菌水漂洗~4次后晾干，待完全干燥后向孔中加入200μL0.5%的結晶紫染色液;于室溫下染色30min，染色完畢后棄去全部染色液，用無菌水漂洗次洗去浮色;待完全晾干后向每孔加入200μL95%的乙醇，室溫下放置15min;用多功能酶標儀測定每孔在OD595nm處的吸光值，即為孔內生物被膜的生成量。同時每個處理設置空白對照，即只含TSB液體培養基不接菌液。

　　1.2.4不同清除劑對S.typhimurium生物被膜的清除效果評估

　　將兩株S.yphimurium以1%的接種量接種于TSB液體培養基中，然后吸取200μL液體接種至96孔聚乙烯板中。每個處理設置三個平行，并設置陰性對照(只添加TSB液體培養基)和陽性對照(添加TSB液體培養基并接種1%的S.yphimurium)，于37℃恒溫培養箱中靜置培養48。

　　采用1.2.3中所述的結晶紫染色法測定每孔OD595nm處吸光值，即為孔內生物被膜的生成量，通過以下公式計算可得每種清除劑對生物被膜的清除率。清除率的計算公式為：清除率(%)=(X1X)/X1×100%其中X1為陽性對照，即不經處理時鼠傷寒沙門氏菌生物被膜的形成量;為經過處理后S.yphimurium生物被膜的形成量。

　　1.2.5MTT法測定不同清除劑處理后yphimurium生物被膜態細胞的代謝活性采用MTT法對不同清除劑處理后生物被膜內細菌的相對代謝活性進行測定，具體操作步驟參考Gerlier等[23]和楊翠云等[24]的方法并稍作改動。采用1.2.4中所述的方法培養并處理生物被膜，經不同清除劑處理完畢后，無菌水清洗晾干。然后向每個孔內分別添加100μL的TSB液體培養基和100μL的MTT溶液(mg/mL)，于37℃恒溫培養箱中避光孵育。小心棄去孔中的MTT及培養基混合液，然后用無菌水清洗除盡孔中的殘液。晾干后向每個孔內添加200μL的DMSO(二甲基亞砜)試劑，37℃靜置1520min，用酶標儀測定其在OD490nm處的吸光值，即得每個孔內細胞的相對代謝活性。

　　1.2.6不同清除劑處理后S.yphimurium生物被膜菌的活菌數菌落計數法檢測生物被膜中活菌數具體方法參考梁瑞[25]所描述的方法。生物被膜的培養及處理方法1.2.4中所述，經不同清除劑處理完畢后，用無菌水洗盡殘液并晾干。之后，向每個孔內添加200μL生理鹽水用細胞刮刀將黏附在底部和孔壁的生物被膜刮下并溶解在生理鹽水中。最后將200μL溶有生物被膜菌的溶液轉移到1.5mL的無菌離心管中，對其依次進行十倍梯度稀釋，然后涂布于LB固體培養基中，于37℃恒溫培養箱中倒置培養24后進行菌落計數，然后計算經不同清除劑的不同濃度處理后兩株S.typhimurium生物被膜菌的活菌數。每組處理均設置三個平行。 每組實驗重復三次，實驗數據處理用平均值標準偏差(eans±SD)表示，利用GraphadPrism9.0作圖軟件對數據進行整理和分析。

　　2結果與分析

　　2.1不同清除劑對S.yphimurium生物被膜形成的影響

　　2.1.1食品工業常用消毒劑對S.yphimurium生物被膜形成的影響從食品工業用消毒劑中選取了其中種比較常見的消毒劑及抑菌成分，根據國家食品衛生標準中推薦的每種消毒劑的使用比例及最高濃度為參考。在兩株S.typhimurium培養的過程中，分別將每種消毒劑以不同濃度添加到培養基中，測定不同消毒劑對細菌生長及生物被膜形成的影響。

　　由以上結果可以得出：幾種常用消毒劑對生物被膜形成過程的抑制作用主要是通過抑制細菌菌體生長的方式實現的。八種消毒劑對兩種鼠傷寒沙門氏菌生物被膜形成的影響趨勢基本是一致的，乙醇、過氧化氫、苯扎氯銨和苯扎溴銨在低濃度下即可基本抑制生物被膜的形成;“84”消毒液、SDS在較高濃度下才對兩種鼠傷寒沙門氏菌生物被膜的形成產生抑制效果;而洗潔精、EDTA即使在高濃度下抑制效果也理想。

　　2.1.2食品工業常用食品防腐劑對S.typhimurium生物被膜形成的影響

　　食品工業用化學防腐劑已被證實在一定劑量及時間內可以防止食品的腐敗變質并且是安全的。本次研究選取了食品中常用的四種防腐劑苯甲酸鈉、山梨酸鉀、雙乙酸鈉和乳酸鈉，根據國家食品安全標準中對食品添加劑使用劑量的規定，針對每種防腐劑設置個不同濃度，比較四種防腐劑對S.yphimuriumCDC3和ST34生物被膜形成的影響。

　　2.2.1食品工業常用消毒劑對S.typhimurium生物被膜的清除效果

　　在S.typhimuriumCDC3和.typhimuriumST34形成生物被膜后，利用上述實驗中選取的八種消毒劑在不同濃度下對成熟的生物被膜進行浸泡處理，然后測定處理前后生物被膜的變化。

　　通過結晶紫染色法測定不同消毒劑浸泡處理前后S.typhimuriumCDC3和S.TyphimuriumST34生物被膜在OD595nm處吸光值的變化，以陽性對照為參考，可計算得出每種消毒劑在不同濃度下對生物被膜的清除率。這八種消毒劑對S.typhimuriumCDC3和S.typhimuriumST34生物被膜的清除效果。由中可以看出，乙醇和SDS對生物被膜的清除效果最高才達20%，而且隨著濃度的變化，生物被膜的減少量幾乎沒有太大變化。―84‖消毒液在較高的比例下如∶100或∶50時，對生物被膜的清除率可以達到80%左右，但有效氯成分含量較高時會對人體具有一定的刺激性，因而不是較好的生物被膜清除劑選擇。

　　洗潔精隨著濃度的增加，清除效果呈上升的趨勢。過氧化氫在含量為1%時對.typhimuriumCDC3和S.typhimuriumST34的清除率分別可達到50%和65%左右，當其含量達到6%時，清除率可高達90%。而EDTA、苯扎氯銨、苯扎溴銨的清除效果隨著濃度的增加呈逐步上升的趨勢，在高濃度下可達到60%左右。在八種消毒劑中，清除效果較好的是過氧化氫，其在低濃度下即可基本達到其它幾種清除劑的效果。

　　2.2.2食品工業常用食品防腐劑對S.typhimurium生物被膜的清除效果

　　苯甲酸鈉和山梨酸鉀是食品工業中最常用的兩種食品防腐劑，而雙乙酸鈉和乳酸鈉則經常被用于禽肉制品中，禽肉制品又是S.yphimurium主要的寄主之一。四種防腐劑根據國標規定的使用劑量，在生物被膜成熟之后對其進行浸泡處理，測定生物被膜的生成量。

　　食品工業用消毒劑過氧化氫和“84”消毒液為強氧化劑，在加入過氧化氫后，孔內的生物被膜立即開始溶解，也即說明生物被膜中的成分與強氧化劑過氧化氫發生了反應，從而使大量的生物被膜溶解[29,30]，而“84”消毒液只有在高濃度下才有此效果;苯扎氯銨、苯扎溴銨則均為陽離子表面活性劑，可以和生物被膜中游離的部分自由基結合，從而降解部分生物被膜，洗潔精的主要成分物質也是表面活性劑，可以溶解、分散生物被膜中的部分物質，從而達到清除生物被膜的效果[31,32]。

　　而食品防腐劑主要是通過抑制破壞或損傷微生物的細胞壁或細胞膜而抑制其生長，而成熟生物被膜具有致密的膜狀結構，導致防腐劑不能發揮更好的清除作用[33,34]。而天然成分物質多是萜類、酚類及醛類物質，這些物質可以分散或是破壞成熟生物被膜的結構，從而清除部分生物被膜，具體破壞生物被膜結構的機制還需進一步的探索[26]。

　　在所有選擇的三大類清除劑中，乙醇、過氧化氫、苯扎氯銨和苯扎溴銨這四種食品工業用消毒劑可以較好的抑制生物被膜內細胞的代謝活性，且可以大大降低被膜內的活菌數;種食品防腐劑處理后對于生物被膜內細胞代謝活性和活菌數有一定的影響，但效果不是很顯著;另外，香芹酚、肉桂醛和百里香精油在殺滅生物被膜內活細胞方面也有很好的效果，乳酸鏈球菌素幾乎不抑制沙門氏菌的生長。

　　結論與討論

　　本研究分別選取了食品工業上常用的幾種化學消毒劑：乙醇、―84‖消毒液、洗潔精、苯扎氯銨和苯扎溴銨，另外還有金屬螯合劑EDTA和表面活性劑SDS;食品加工中常用的四種防腐劑苯甲酸鈉、山梨酸鉀、雙乙酸鈉及乳酸鈉;最后又選擇了幾種天然成分物質：香芹酚、肉桂醛、百里香精油、茶多酚以及抗菌物質乳酸鏈球菌素。以S.typhimuriumCDC3和S.yphimuriumST34為研究對象，分別從對生物被膜形成過程的影響、對成熟生物被膜的清除效果、以及不同物質處理后生物被膜菌內細胞的代謝活性及活菌存活數這四個方面，評估了這些物質在鼠傷寒沙門氏菌生物被膜控制方面的作用效果。

　　可以得出以下幾個結論：首先，化學消毒劑乙醇、苯扎氯銨、苯扎溴銨在較低濃度下即可有效的抑制S.typhimuriumCDC3和S.typhimuriumST34生物被膜的形成，并且對成熟的生物被膜浸泡處理后，可以大大降低其內細胞的代謝活性及活菌數，不過在清除成熟生物被膜方面，較為理想的是過氧化氫，當其濃度達到6%時，對生物被膜的清除率可達到90%左右。本研究中，苯甲酸鈉、山梨酸鉀和乳酸鈉在高濃度下對兩株S.typhimurium的生物被膜形成有較明顯的抑制作用，但低濃度下效果不好，而雙乙酸鈉則幾乎沒什么作用。謝麗斯等人[35]用山梨酸鉀和苯甲酸鈉對金黃色葡萄球菌生物被膜形成過程的影響進行研究，得出了在添加低質量濃度防腐劑山梨酸鉀和苯甲酸鈉后，金黃色葡萄球菌成膜能力也受到抑制的結論，這和本研究所得出的結論稍有不同。

　　在對成熟生物被膜清除的實驗中發現，防腐劑的清除效果很弱，較高濃度下才有發揮一定的清除作用。四種食品防腐劑處理.typhimuriumCDC3和S.typhimuriumST34生物被膜后，對其內的細胞代謝活性進行檢測發現隨著防腐劑濃度的增加，被膜內細胞的活性降低，再通過平板稀釋涂布法定量檢測活菌數時，發現活菌數的下降程度也不明顯，也即防腐劑處理后，細胞活性的降低只是使沙門氏菌進入了休眠狀態，并沒有完全殺滅細菌，一旦條件合適，細菌即可繼續生存。

　　在幾種天然食品添加劑中，比較理想的是肉桂醛、香芹酚和百里香精油，這三種物質在低濃度下可基本抑制生物被膜的產生。這與戴雨蕓等人[18]所研究的香芹酚對金黃色葡萄球菌生物被膜形成的抑制，張文艷等[36]研究的肉桂醛對食源性致病菌金黃色葡萄球菌和腸炎沙門氏菌生物被膜的形成有抑制作用的結果是一致的，Niu等[37]也發現肉桂醛可以通過殺死細菌來有效抑制.coli生物被膜的形成，在本研究中也發現，添加劑可以通過抑制菌體的生長而抑制生物被膜的產生。當這三種天然食品添加劑作用于成熟生物被膜后也可有效殺死生物被膜內的活菌數。目前關于天然成分物質對生物被膜形成的抑制機理主要涉及抑制細菌菌體的生長、抑制群體感應系統，以及抑制生物被膜中胞外多糖和胞外蛋白的合成等方面。

　　植物精油的成分復雜，一種精油通常由幾十種到幾百種化合物組成，主要為萜烯類化合物、芳香族化合物、脂肪族化合物、含硫含氮化合物等小分子簡單化合物[38]。已有很多研究證明天然植物精油中的主要成分是比較理想的群體感應抑制劑，群體感應抑制劑只是輕微抑制或不抑制細菌的生長，不會細菌的生長造成壓力[26,39]。有研究表明芳樟醇不僅能抑制細菌的群體感應系統，還具有殺菌作用，芳樟醇可以破環銅綠假單胞菌的生物被膜，導致核酸外泄，殺滅細菌[40]。另有研究發現，低濃度的大蒜活性化合物在不影響銅綠假單胞菌生長的情況下，抑制該菌QS系統調控的毒力因子的產生，并且抑制生物被膜的形成以及群集運動[26,41]。

　　此外，天然植物成分還可通過抑制或降解生物被膜基質的主要成分來抑制生物被膜的形成。如程鋒等[42]發現茶樹精油可通過抑制agr、ica、cid及sarA等種基因的表達，抑制金黃色葡萄球菌生物被膜形成過程中eDNA的釋放以及PIA的合成，降低了生物被膜的黏附性，從而表現出抗生物被膜活性。而在本研究中發現香芹酚、肉桂醛和百里香精油可抑制細菌菌體的生長使菌體產生物被膜能力下降。如Klan等也發現牛至中的香芹酚可通過降低變形鏈球菌的代謝活性以抑制生物被膜的形成。對于香芹酚、肉桂醛和百里香精油對本研究中鼠傷寒沙門氏菌生物被膜形成產生抑制的具體影響機制還需進一步的研究探索。

　　根據以上的結果，我們可以總結出，不管是何種物質在清除成熟生物被膜時都沒有達到100%的效果，這就可能會使得殘留的生物被膜中微生物繼續生長，導致加工環境或者產品受到再次污染。經不同材料處理后雖然有些物質表現出了較好的殺生物被膜菌的效果，但還是會有少部分細菌被生物被膜包裹起來而增強了對外界環境的耐受力，這也會是一個安全隱患[43]。控制生物被膜污染的最適宜的方法是在初始培養前，加入抑菌物質，抑制細菌菌體的生長，從而有效地控制生物被膜的形成。

　　本研究共選取了17種清除劑，分別是食品工業常用的種消毒劑、常用的種食品防腐劑以及種天然食品添加劑，分別從四個方面系統比較了它們對生物被膜的控制及清除效果，發現過氧化氫不僅可以有效抑制S.typhimurium生物被膜的形成，對成熟生物被膜的清除也具有較好的效果，這對于食品工業中控制鼠傷寒沙門氏菌生物被膜的污染具有一定的參考意義。此外，在生物被膜形成的初始階段控制生物被膜的污染是最為有效的。

　　目前，國內對于生物被膜的控制研究多是集中在革蘭氏陽性菌如金黃色葡萄球菌、單增李斯特菌等和革蘭氏陰性菌如副溶血性弧菌、銅綠假單胞菌等，針對沙門氏菌尤其是S.typhimurium生物被膜的控制及清除研究報道的還較少。即使有報道，也只是單一的選取一種清除劑，并沒有系統地比較多種清除劑或是不同控制方法的清除效果。本研究選取的清除劑涉及種類多、涵蓋范圍廣，可以為尋找有效控制生物被膜污染提供一個思路。

　　參考文獻

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　　作者：鄭麗平，陸兆新，孔梁宇，胡安妥，孟凡強，別小妹