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　　【摘要】 目的篩選蕁麻抗風濕活性部位，為蕁麻的開發利用提供理論依據。方法萃取法制備不同極性的溶劑部位(石油醚部位、乙醚部位、醋酸乙酯部位、水溶性部位)，小鼠急性耳廓腫法、棉球肉芽腫法篩選抗炎活性部位;小鼠熱板法、醋酸扭體法篩選鎮痛活性部位。結果醋酸乙酯部位具有顯明的抗炎和鎮痛活性，能明顯抑制二甲苯所致小鼠急性耳廓腫、小鼠棉球肉芽腫及熱板、冰醋酸所致小鼠疼痛。結論 醋酸乙酯部位為蕁麻抗風濕活性部位，值得進一步研究。

　　【關鍵詞】 蕁麻 風濕 活性部位

　　蕁麻Urtica Fissa E.pritz.在我國被廣泛用于風濕性關節炎、類風濕性關節炎等病的治療，療效確切[1]，但作用物質基礎研究未見報道;同時蕁麻藥材也缺乏質量控制指標，因此尋找蕁麻活性成分具有十分重要的意義。為研究蕁麻抗風濕的活性成分，并為蕁麻的質量控制提供科學依據，筆者對蕁麻抗風濕的活性部位進行了藥理篩選。現將研究結果報道如下。

　　1 器材

　　1.1 材料與試劑

　　作者采于四川省成都溫江縣通平鎮，經作者鑒定為蕁麻Urtica fissa E.Pritz，全草曬干備用。乙醇為化學純，其余化學試劑均為分析純。

　　1.2 動物昆明種小鼠(清潔級)，體重(20±2)g，由復旦大學醫學實驗動物中心提供(合格證號：(滬)SCSK2002��0026)。

　　1.3 儀器與軟件R502B型旋轉蒸發儀(上海申生科技有限公司)，AB104�睸電子天平(深圳君達時代儀器有限公司)。統計軟件：PEMS 3.0。

　　2 方法與結果

　　2.1 受試組分的制備蕁麻干燥全草8 kg，粉碎成粗粉，95%工業乙醇150 L分3次回流提取，提取液合并，回收部分乙醇，室溫放置24 h，析出大量硝酸鉀結晶，濾去結晶，繼續回收乙醇至干得醇浸膏(A)685 g。將醇浸膏懸浮于水，用石油醚(30～60℃)萃取3次，2 500 ml/次，減壓收盡溶劑得石油醚浸膏(B)306 g;乙醚萃取3次，2 500 ml/次，減壓收盡溶劑得乙醚浸膏(C)22 g。繼用醋酸乙酯萃取3次，3 000 ml/次，減壓收盡溶劑得醋酸乙酯浸膏(D)95 g，母液減壓收盡溶劑得浸膏(E)242 g。各組分均用0.5%CMC溶液超聲溶解，分別配成50 mg·ml-1的溶液備用。

　　2.2 各組分的抗炎作用比較

　　2.2.1 小鼠急性耳廓腫取雄性小鼠60只，隨機分6組，每組10只。按表1劑量腹腔注射給藥，給藥30 min后，用二甲苯0.1 ml均勻涂布于各鼠右耳的正反面，再過30 min后處死，用8 mm打孔器在兩耳同一部位扎下左右耳片，精密稱重，以右耳的重量減去左耳的重量作為耳廓炎性腫脹度，計算右耳腫脹度及抑制率[2]。結果見表1。可以看出，A，D，E組有顯著的抗炎活性，明顯抑制二甲苯所致的小鼠急性耳廓腫，其中D的作用最強。而B，C組均無明顯抗炎活性。表1 蕁麻各組分對小鼠耳廓腫脹的影響(略)

　　2.2.2 棉球肉芽腫雄性小鼠，在乙醚淺麻醉下腹部去毛消毒。腹部切口，將兩個已高壓滅菌的5 mg棉球分別植入小鼠兩側腋窩皮下，縫合皮膚后消毒。隨機分組，手術當天按表2劑量給藥，連續7 d。末次給藥1 h后處死小鼠，取出棉球，在70℃烘箱中干燥2 h后稱重，減去原棉球重量即為肉芽腫重量[3]。結果表明，A，D，E組能明顯抑制小鼠棉球肉芽腫，D的作用最顯著，能顯著抑制肉芽組織的增生。結果見表2。表2 蕁麻各組分對棉球肉芽腫重量的影響(略)

　　2.3 各組分的鎮痛作用比較

　　2.3.1 醋酸扭體法將60只小鼠(雌雄各半)，隨機分為6組，每組10只，稱重并編號。陰性對照組腹腔注射0.2 ml/20 g(體重)生理鹽水，按表3劑量給藥。在給藥60 min后腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 ml/只。觀察并記錄注射醋酸溶液后15 min內出現扭體反應的次數。實驗完畢，計算藥物鎮痛百分率[4]，結果見表3。可見，A，D，E組均有明顯的鎮痛作用，能明顯減少冰醋酸所致的小鼠扭體次數，其中D組作用最強;A，D組還能明顯延緩小鼠扭體的出現。表3 蕁麻各組分對醋酸所致小鼠疼痛的影響(略)

　　2.3.2 熱板法選擇對55℃熱板痛覺反應在10～30 s者60只雄性小鼠，隨機分為6組，每組10只。每只小鼠給藥前及給藥(按表4給予藥物及劑量)后30，60，90，120 min測定痛反應潛伏期，計算痛閾提高率[4]。結果見表4。結果證明A，D，E組有明顯的鎮痛作用，以D組的作用最強。B，C組無明顯活性。表4 蕁麻各組分對鼠熱板致痛反應的影響(略)

　　3 討論

　　蕁麻在我國用于治療風濕、類風濕療效確切，歷史悠久，但對其作用物質基礎研究目前尚屬空白。本文在前期研究基礎上，首次對蕁麻的活性部位進行了追蹤，確定了其抗風濕活性部位。研究證明該活性部位具有明顯的抗炎活性，能明顯抑制二甲苯致小鼠急性耳廓腫以及小鼠棉球肉芽腫，提示該活性部位不僅對早期滲出炎癥有抑制作用，同時對炎癥后期的慢性結締組織增生也有較強的抑制作用;此外該部位還具有明顯的鎮痛活性，能明顯抑制熱板、冰醋酸所致小鼠疼痛，表明該活性部位不僅對炎性疼痛具有抑制作用，同時對其他誘因引起的疼痛也有一定的抑制作用。證明該活性部位有利于風濕、類風濕炎癥及疼痛的緩解，為蕁麻抗風濕的活性部位。

　　此外，我們還對蕁麻抗風濕活性部位的化學成分進行了研究，從中分離并鑒定了山柰酚��3�睴��β�睤�策拎�葡萄糖苷、咖啡酸、綠原酸、東茛菪苷、東茛菪內酯、山柰酚��3�睴�彩|香糖苷、槲皮素��7�睴��β�睤�策拎�葡萄糖苷、異鼠李素��3�睴�彩|香糖苷等多個黃酮類及酚酸類成分[5]，其中東茛菪苷、東茛菪內酯已被證實具有明顯鎮痛活性，槲皮素、咖啡酸、綠原酸等具有明顯的抗炎作用和免疫調節作用。這進一步提示醋酸乙酯部位為蕁麻治療風濕的活性部位，黃酮及酚酸類成分為蕁麻抗風濕的活性成分。對該部位進行深入研究具有重要意義，可為蕁麻的質量控制及抗風濕的作用機理研究提供科學依據。

　　本研究采用萃取方法分離制備活性部位，其抗炎、鎮痛作用明顯優于其他部位且具有統計學意義，表明采用萃取方法分離蕁麻抗風濕活性部位的方法不僅簡便，而且可行。

　　【參考文獻】

　　[1]王夢月，劉 瑛，衛瑩芳，等.川產蕁麻藥理作用的初步研究[J].中國民族民間醫藥雜志，2001，4：229.

　　[2]陳 奇.中藥藥理實驗方法學[M].北京：人民衛生出版社，1994：70.

　　[3]楊 峰，崔祝梅，張繼眾，等.前列泰片對前列腺增生及抗炎鎮痛作用的實驗研究[J].中成藥，1994，16(4)：38.

　　[4]徐叔云，卞如濂，陳 修. 藥理實驗方法學[M].北京：人民衛生出版社，2002：882.

　　[5]王夢月，衛瑩芳，李曉波.蕁麻抗風濕活性部位的化學成分研究[J].中草藥，2006，37(9)：1140.