[摘要]目的：建立一種玫瑰紅景天活性成分絡塞維的合成方法，并進行工藝優化。方法：以肉桂醇為原料，與2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-吡喃溴代葡萄糖進行糖苷化反應，脫保護得肉桂醇基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，并通過保護與脫保護策略將其改造成糖受體，與2,3,4-三-O-乙酰基-β-L-溴代阿拉伯糖進行合成，最后脫保護得絡塞維。結果：通過該方法合成了二糖苷類化合物絡塞維，其結構經核磁共振氫譜(1H-NMR)和核磁共振碳譜(13CNMR)表征。結論：合成方法反應條件溫和、操作簡單、成本低，獲得的產物和關鍵中間體可用于相關化合物的深入研究。

　　[關鍵詞]玫瑰紅景天;絡塞維;三苯基氯甲烷;合成

　　絡塞維為肉桂醇基-O-6-O-(α-L-吡喃阿拉伯糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷，是由肉桂醇與蠶豆糖所構成的二糖苷。絡塞維是天然抗氧化藥物玫瑰紅景天RhodiolaroseaL.的活性成分和指標性成分[1]。據文獻報道，其具有抗疲勞、抗輻射、抗氧化、抗癌、增強免疫、改善學習記憶能力等多種藥理活性[2-5]，應用前景廣闊。絡塞維主要是從玫瑰紅景天中提取、分離、純化后制備[6]，但含量僅為0.21%～0.55%[1]，使得分離純化難度大、成本高，有必要進行化學合成。

　　目前，絡塞維的合成方法主要有2種[7-9]：1)Msashi等[7]將D葡萄糖與丙烯醇通過固定化β-葡萄糖苷酶催化成苷，然后通過保護與脫保護策略，得到烯丙基-2,3,4-三-O-苯甲�；�-β-D-吡喃葡萄糖苷，再與溴代阿拉伯糖反應，最后與苯基硼酸反應，脫苯甲�；�保護基得絡塞維。但該方法使用的丙烯醇為劇毒、管制藥品，醋酸鈀和固定化β-葡萄糖苷酶價格昂貴，且須經過2次苯甲酰基保護的二糖苷的分離，操作繁瑣。

　　2)另一種思路是通過糖6位羥基暴露的D-吡喃葡萄糖受體與L-吡喃阿拉伯糖供體合成二糖中間體，再將其制備成二糖供體與肉桂醇進行糖苷化反應，最后脫保護基得絡塞維。但是在二糖中間體合成過程中副產物多，分離困難，且進一步制備二糖供體時收率大大降低，很難得到。

　　本研究以肉桂醇為原料，與全乙酰-αD-溴代葡萄糖進行成苷反應，經脫乙酰基保護獲得肉桂醇基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，接著用三苯基氯甲烷對糖的6ʹ位羥基選擇性保護、其他位羥基乙�；�保護及脫糖6ʹ 位保護基，特異性地將糖6ʹ位伯羥基暴露，再與全乙酰-β-L-溴代吡喃阿拉伯糖成苷，最后脫乙酰保護基得到絡塞維。

　　本方法充分考慮糖類化合物合成過程中的區域選擇性和立體選擇性，收率較高，且未見文獻報道。獲得的產物和關鍵中間體可用于相關化合物的深入研究。本研究還可為苯丙素糖苷類化合物的制備提供參考，有助于該類天然產物在醫藥領域的進一步應用。

　　1材料

　　ASCEND-400型核磁共振儀(瑞士Bruker公司);WZZ-2B型半自動旋光儀(上海精密科學儀器有限公司);RE52AA型旋轉蒸發儀(上海亞榮生化儀器廠);JM-B5002型電子天平(余姚市紀銘稱重校驗設備有限公司);X-5型顯微熔點測定儀(鞏義市科瑞儀器有限公司);LC20AT型制備液相色譜儀(日本島津公司);Cosmosil5C18AR-II型制備色譜柱(250mm×10mm，5μm，日本NacalaiTesque公司)。濃硫酸、乙酸酐、甲醇(北京化工廠);甲醇鈉(AcrosOrganics公司);33%溴化氫乙酸溶液(33%HBrCH3COOH)、三苯基氯甲烷(北京伊諾凱科技有限公司);Ag2CO3(天津福晨化學試劑廠);肉桂醇(阿拉丁試劑上海有限公司);D-葡萄糖、L-阿拉伯糖(阿達瑪斯試劑有限公司);薄層色譜(TLC)板G(青島海洋化工有限公司)。

　　2方法與結果

　　2.11,2,3,4,6-五-O-乙�；�-α-D-吡喃葡萄糖(化合物1)的合成取乙酸酐11.5mL、濃硫酸30μL，置于圓底燒瓶中，冰浴條件下，加入D-葡萄糖4.0g，攪拌反應1h，撤除冰浴，室溫繼續反應3h，TLC監測至反應完全，反應液用二氯甲烷50mL萃取3次，收集、合并有機相并用水洗至中性，無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉后，將有機相減壓濃縮得白色粉末，收率為93.7%，熔點為112~114℃，與文獻報道一致[10]。

　　2.22,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-溴代吡喃葡萄糖(化合物2)的合成取化合物18.0g用二氯甲烷10mL攪拌溶解，加入33%HBr-CH3COOH溶液5mL，室溫反應2~3h，TLC監測至反應完全，反應液分散于適量冰水中，收集有機相，水相用二氯甲烷15mL萃取3次，合并有機相并用水洗至中性，無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉后，減壓回收溶劑，甲基叔丁基醚結晶，得白色晶體，收率為87.6%，熔點為86~88℃，與文獻報道一致[11]。

　　2.3肉桂醇基-O-2,3,4,6-四-O-乙�；�-β-D吡喃葡萄糖苷(化合物3)的合成取肉桂醇1.3g用二氯甲烷20mL攪拌溶解，加入Ag2CO32.0g，化合物26.6g，避光室溫反應過夜，TLC監測至反應完全，抽濾，濾餅用二氯甲烷洗1次，合并濾液，減壓回收溶劑，得粗產物，直接投入2.4項下反應。

　　2.4肉桂醇基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(化合物4)的合成將化合物3粗產物以5倍量甲醇于圓底燒瓶中攪拌溶解，加入適量甲醇鈉調pH8~9，室溫反應4h，TLC監測至反應完全，加適量陽離子交換樹脂調pH6~7，濾除陽離子交換樹脂，減壓回收溶劑，柱色譜分離(二氯甲烷-甲醇，12:1)，得白色粉末，收率為54.7%，熔點為98~99℃。

　　2.5肉桂醇基-O-6-O-三苯基甲基-β-D-吡喃

　　葡萄糖苷(化合物5)的合成參考文獻方法[13]，取化合物41.0g置于圓底燒瓶中，用吡啶5mL攪拌溶解，加入三苯基氯甲烷1.4g，于50℃下反應7h，TLC監測至反應完全，降溫至室溫后投入2.6項下反應。

　　2.6肉桂醇基-O-2,3,4-三-O-乙�；�-6-O-三苯基甲基-β-D-吡喃葡萄糖苷的合成(化合物6)向2.5項下體系中加入乙酸酐1.9mL，4-二甲氨基吡啶(DMAP)20mg，室溫攪拌過夜，TLC監測至反應完全，將反應液分散于適量冰水中，用二氯甲烷10mL萃取3次，合并有機相，冰水和適量的稀鹽酸各洗2次至弱酸性，最后用冰水洗至中性，無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉后，減壓回收溶劑，柱色譜分離(石油醚乙酸乙酯，5:1)，得黃色糖漿狀物質，收率為76.4%。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ：7.44(8H，d，J=7.6Hz，H-5，9，3ʹʹ，7ʹʹ，9ʹʹ，13ʹʹ，15ʹʹ，19ʹʹ)，7.34(8H，dd，J=7.2，14.8Hz，H-6，8，4ʹʹ，6ʹʹ，10ʹʹ，12ʹʹ，16ʹʹ，18ʹʹ，)，7.26(4H，t，J=7.2Hz，H-7，5ʹʹ，11ʹʹ，17ʹʹ)，6.68(1H，d，J=16Hz，H-3)，6.41(1H，dt，J=5.6，16.0Hz，H-2)，5.25(1H，t，J=9.6Hz，H-3ʹ)，5.18(1H，t，J=9.6Hz，H-4ʹ)，4.96(1H，t，J=8.0Hz，H2ʹ)，4.92(1H，d，J=8.0Hz，H-1ʹ)，4.51(1H，dd，J=5.2，13.2Hz，H-1)，4.36(1H，dd，J=6.0，13.6Hz，H-1)，3.91~2.87(3H，m，H-5ʹ，6ʹ)，2.05(3H，s，glc-4ʹ-OAc)，1.95(3H，s，glc-3ʹ-OAc)，1.72(3H，s，glc-2ʹOAc)。13C-NMR(CDCl3，100MHz)δ：170.1(glc-2ʹ-OAc)，169.6(glc-3ʹOAc)，169.1(glc-4ʹ-OAc)，143.9(C2ʹʹ，8ʹʹ，14ʹʹ)，136.7(C-4)，132.4(C3)，129.1(C-6，8)，128.7(C-4ʹʹ，6ʹʹ，10ʹʹ，12ʹʹ，16ʹʹ，18ʹʹ)，128.4~128.3(C-7，3ʹʹ，7ʹʹ，9ʹʹ，13ʹʹ，15ʹʹ，19ʹʹ)，127.5(C-5ʹʹ，11ʹʹ，17ʹʹ)，126.9(C-5，9)，126.0(C-2)，99.3(C-1ʹ)，86.3(Ph3-C)，73.0(C-3ʹ)，72.4(C-5ʹ)，71.7(C-2ʹ)，69.4(C-4ʹ)，68.6(C1)，61.8(C-6ʹ)，20.9(glc-4ʹ-OAc)，20.8(glc-2'-OAc)，20.6(glc-3ʹ-OAc)。

　　2.7肉桂醇基-O-2,3,4-三-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖苷的合成(化合物7)取化合物61.0g用二氯甲烷10mL攪拌溶解，加入冰醋酸2.5mL，于−20℃下滴加33%HBr-CH3COOH溶液195.8μL，并在此溫度下繼續反應2h，TLC監測至反應完全，將反應液分散于適量冰水中，收集有機相，水相用二氯甲烷5mL萃取3次，合并有機相，并用冰水洗至中性，無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉后，減壓回收溶劑，柱色譜分離(石油醚-乙酸乙酯，2:1)，得無色糖漿狀物質，收率為70.8%。

　　1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ：7.38(2H，d，J=7.2Hz，H-5，9)，7.33(2H，t，J=7.2Hz，H-6，8)，7.26(1H，t，J=7.2Hz，H-7)，6.60(1H，d，J=16.0Hz，H-3)，6.23(1H，dt，J=6.4，16.0Hz，H-2)，5.27(1H，t，J=9.6Hz，H-3ʹ)，5.07(1H，t，J=9.6Hz，H-4ʹ)，4.99(1H，dd，J=8.0，9.6Hz，H-2ʹ)，4.66(1H，d，J=8.0Hz，H1ʹ)，4.54~3.53(5H，m，H-1，5ʹ，6ʹ)，2.12(3H，s，glc-2ʹ-OAc)，2.07(3H，s，glc-4ʹ-OAc)，2.06(3H，s，glc-3ʹOAc)。13C-NMR(CDCl3，100MHz)δ：171.7(glc-2ʹ-OAc)，170.3(glc-3ʹOAc)，169.6(glc-4ʹ-OAc)，136.4(C4)，133.0(C-3)，128.7(C-6，C-8)，128.0(C-7)，126.5(C-5，C-9)，124.7(C-2)，99.7(C-1ʹ)，75.5(C-3ʹ)，74.1(C-5ʹ)，71.5(C-2ʹ)，69.9(C4ʹ)，68.9(C-1)，63.0(C-6ʹ)，20.8(glc-2ʹ-OAc)，20.8(glc-4ʹ-OAc)，20.6(glc-3ʹ-OAc)。

　　2.8肉桂醇基-O-2,3,4-三-O-乙酰基-6-O-(2,3,4-三-O-乙�；�-α-L-吡喃阿拉伯糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷的合成(化合物8)取化合物70.4g用二氯甲烷6mL攪拌溶解，加入Ag2CO30.2g，2,3,4-三-O-乙酰基-β-L-溴代吡喃阿拉伯糖0.5g(制備同2.1、2.2項下方法)，避光室溫反應過夜，TLC監測至反應完全，抽濾，濾餅用二氯甲烷洗1次，減壓蒸干溶劑，制備液相色譜法分離(甲醇-水，7:3)，得化合物8，收率為62.7%。

　　3討論

　　3.1化合物1的合成

　　以葡萄糖為原料，濃硫酸為催化劑，乙酸酐為�；�試劑，合成全乙酰-α-D-吡喃葡萄糖。在D-葡萄糖投料4.0g，濃硫酸用量為30μL的條件下，以室溫反應完全所需時間和收率為指標，考察葡萄糖-乙酸酐投料比分別為1:3.5、1:4.5、1:5.5、1:7.0，結果表明，化合物1收率分別為65.6%、91.9%、93.7%、94.6%，反應時間分別為18.0、5.0、3.0、2.5h。綜合成本和效率，以葡萄糖-乙酸酐1:5.5為最佳條件。3.2化合物2的合成用33%HBr-CH3COOH溶液對化合物1進行溴代反應，葡萄糖1.5g用33%HBrCH3COOH溶液1mL反應完全，且產率較高。溴代糖常溫易分解，后處理需在低溫下進行，用甲基叔丁基醚結晶。

　　3.3化合物4的合成

　　將2.3項下粗產物在堿性條件下與甲醇進行酯交換反應，不同用量的甲醇對反應完成時間和收率有影響，甲醇用量增加，反應時間縮短，產率提高。綜合成本和效率，選用5倍量甲醇進行反應。

　　3.4化合物8的合成

　　化合物7在Ag2CO3催化下與2,3,4-三O-乙�；�-β-L-溴代吡喃阿拉伯糖進行親核取代反應，合成糖苷，考察各反應物的投料比對產物收率的影響。結果表明，隨著Ag2CO3和溴代阿拉伯糖投料量的增加，反應收率增加，但變化幅度不大。從節約成本的角度，選擇化合物7-Ag2CO3-三乙酰溴代阿拉伯糖投料比為1:0.75:1.5，收率為62.7%。

　　3.5化合物9的合成

　　同化合物4的合成，用甲醇和甲醇鈉脫乙酰基保護，但為了防止脫保護過程中二糖鏈斷開，應加大甲醇的用量(10倍量)，使其在短時間內快速反應完全。

　　4結論

　　近年來，研究者們逐漸認識到寡糖及糖苷類化合物的生物學意義，寡糖類化合物的化學合成技術也快速發展。大量的天然產物的糖基部分存在諸如龍膽二糖、蕓香糖、蠶豆糖等1→6連接二糖，但是合成報道較少，因此，探索一條區域選擇性和立體選擇性高的路線合成1→6連接二糖具有一定的研究意義。本研究在合成絡塞維的過程中，用三苯基氯甲烷對葡萄糖的6ʹ位伯羥基進行選擇性保護，脫保護后6ʹ位羥基裸露從而合成1→6連接糖苷鍵。三苯基氯甲烷基團龐大，使用其作保護基團具有選擇性高、保護基團產物穩定和保護基團容易脫去的優點。

　　食品論文投稿刊物：《食品工業科技》是國家輕工業聯合會(原國家輕工業部)主管，北京市食品工業研究所主辦。在中國食品行業具有權威性，代表著中國食品工業發展水平。 內容：集市場分析，技術探討于一身，市場分析包括：權威導航，行業觀潮，法規前沿，安全視角，互動平臺，展會風景線，企業先鋒，資訊縱橫等，文章以宏觀分析為主，旨在為企業決策者了解市場，拓展思路提供幫助。

　　本研究使用三苯基氯甲烷作為保護基團合成絡塞維具有創新性，以期能夠為相關二糖的合成研究工作提供新思路。絡塞維有廣泛的生物學活性，本研究制備糖基供體后，在成苷反應中通過7步合成絡塞維，總產率為15.92%。與文獻相比雖然未能縮短合成步驟，但實驗成本大大降低，且條件溫和、操作簡單，對人體的危害和環境的污染影響較小，具有良好的工業化前景。需要說明的是，在化合物8的合成過程中，由于樣品量較少，采用了制備液相進行分離，如后期大量制備可進一步探索硅膠柱色譜法進行分離。

　　參考文獻：

　　[1]盧義德，姚欣，張囡，等.HPLC法測定玫瑰紅景天中3種有效成分的含量[J].西北藥學雜志，2009，24(6)：452-453.

　　[2]張慧云，馬朝陽，王洪新.玫瑰紅景天提取物rosavin抗疲勞作用的實驗研究[J].食品工業科技，2013，34(6)：357-359.

　　作者：鐘婷，胡亞丹，蘇進，楊淑珍，何貝橋，張園園*